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禽蛋中卡巴氧和喹乙醇代謝物殘留量的測定
參考GB 31659.9-2025《食品安全國家標準 禽蛋中卡巴氧和喹乙醇代謝物殘留量的測定 液相色譜-串聯質譜法》
喹噁啉類藥物(卡巴氧、喹乙醇等)曾廣泛應用于畜禽養殖領域，用于抗菌促生長、防控疫病，但此類藥物的代謝產物——喹噁啉-2-羧酸(QCA，卡巴氧主要代謝物)與3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA，喹乙醇主要代謝物)，具有潛在遺傳毒性、致癌性及蓄積毒性，長期攝入含此類殘留的禽蛋會對人體健康造成潛在危害。
國家市場監督管理總局、國家衛生健康委員會與農業農村部聯合發布了GB 31659.9-2025《食品安全國家標準 禽蛋中卡巴氧和喹乙醇代謝物殘留量的測定 液相色譜-串聯質譜法》，該標準于2025年9月1日正式實施。
依據GB 31650-2019及中華人民共和國農業部公告 第2638號，喹乙醇在食品動物中禁用、不得檢出；MQCA僅豬肌肉≤4μg/kg、肝臟≤50μg/kg，禽蛋、油脂及其他動物源性食品均不得檢出。
迪馬科技參考GB 31659.9-2025《食品安全國家標準 禽蛋中卡巴氧和喹乙醇代謝物殘留量的測定 液相色譜-串聯質譜法》，對方法中流動相、提取、凈化步驟都進行了優化，直接使用磷酸氫二鈉緩沖液提取，二氯甲烷沉淀蛋白，經ProElut® PXA 150mg/6mL (Cat.#:68304)固相萃取柱凈化，色譜柱Endeavorsil® C18 100x2.1mm 1.8μm(Cat.#:87003)分析雞蛋、鴨蛋、鵪鶉蛋樣品中的QCA和MQCA，使用內標法計算，添加水平為0.5μg/kg、5.0μg/kg、20μg/kg的樣品添加回收率范圍87%-109%，符合標準要求。
本方適用于雞蛋、鴨蛋、鵪鶉蛋中QCA和MQCA的檢測，方法檢出限為0.2μg/kg，定量限為0.5μg/kg。
(1) 喹噁啉-2-羧酸和3-甲基喹噁啉-2-羧酸標準儲備液：由迪馬科技標準品部提供(Cat.#: 48854)，濃度為100μg/mL。
(2) 喹噁啉-2-羧酸和3-甲基喹噁啉-2-羧酸混合標準中間液Ⅰ：準確吸取適量混合標準儲備液，用0.1％甲酸水:甲醇=1:9定容，終濃度為2μg/mL。
(3) 喹噁啉-2-羧酸和3-甲基喹噁啉-2-羧酸混合標準中間液Ⅱ：準確吸取適量混合標準儲備液，用0.1％甲酸水:甲醇=1:9定容，終濃度為500ng/mL。
(4) 喹噁啉-2-羧酸和3-甲基喹噁啉-2-羧酸混合標準中間液Ⅲ：準確吸取適量混合標準儲備液，用0.1％甲酸水:甲醇=1:9定容，終濃度為50ng/mL。
(5) 喹噁啉-2-羧酸-d4和3-甲基喹噁啉-2-羧酸-d4混合內標工作液：準確吸取適量混合內標儲備液(由迪馬科技標準品部提供Cat.#:48855，濃度10μg/mL)，用0.1％甲酸水:甲醇=1:9定容，終濃度為200ng/mL。
(1) 稱取5g樣品于50mL離心管中，加入50μL混合內標工作液；
(2) 加入10mL磷酸鹽緩沖液*，渦旋混勻；
(3) 加入10mL二氯甲烷，振蕩5min，8000rmp離心5min；
(4) 吸取全部上清液，加入0.1mol/L氫氧化鈉溶液*0.5mL，混勻待凈化。
磷酸鹽緩沖液*：稱取十二水合磷酸氫二鈉3.58g，加入1000mL水溶解。
0.1mol/L氫氧化鈉溶液*：稱取1.0g氫氧化鈉，加水溶解，冷卻至室溫后，加水稀釋至250mL，混勻。
ProElut® PXA 150mg/6mL (Cat.#:68304)
(1)活化：依次加入3mL甲醇、3mL水，棄去流出液；
(2)上樣：取全部待凈化液加入柱中，棄去流出液；
(3)淋洗：加入3mL 0.05mol/L 氫氧化鈉溶液*，加入3mL甲醇，棄去流出液；
(4)洗脫：加入6mL 2%甲酸甲醇*，收集所有流出液；
(5)重新溶解：40℃氮吹至0.5mL以下，用0.1%甲酸:甲醇=1:9定容至1mL，經PTFE(Cat.#:37178)濾膜過濾。
0.05mol/L氫氧化鈉溶液*：稱取0.5g氫氧化鈉，加水溶解，冷卻至室溫后，加水稀釋至250mL，混勻。
2%甲酸甲醇*：取2mL甲酸，加甲醇稀釋至100mL，混勻。
UPLC條件
色譜柱: Endeavorsil® C18，100x2.1mm，1.8μm (Cat.#:87003)
流速：0.4mL/min
進樣量：5μL
柱溫：30℃
流動相：A: 0.5%甲酸水 B: 甲醇
質譜條件
電離模式: ESI
掃描方式: 正離子掃描
檢測方式: 多反應監測
電噴霧電壓: 5000V
霧化氣壓力: 50psi
輔助氣壓力: 50psi
氣簾氣壓力: 20psi
離子源溫度: 500℃
下載方案